人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

核突觸蛋白α抗體Alpha-Synuclein 0.1ml

自噬相關(guān)蛋白4B抗體APG4B 0.2ml

α-輔肌動蛋白4(內(nèi)參)抗體alpha Actinin 4-Loading Control 0.1ml

堿性磷酸酶抗體Alkaline Phosphatase 0.1ml

AU1 tag標(biāo)簽抗體AU1 tag 0.1ml

脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1AEBP1 0.2ml

蛋白激酶BAKT1 0.1ml

蛋白激酶BAKT1 0.1ml

血管生成素樣蛋白2抗體ANGL2 0.1ml

血管生成素3/血管生成素4抗體Angiopoietin 4 0.1ml

膜粘連蛋白 I抗體Annexin I 0.1ml

膜粘連蛋白 Ⅱ抗體Annexin A2 0.1ml

活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體ATF1 0.1ml

水通道蛋白4抗體Aquaporin 4 0.1ml

活化復(fù)制因子2抗體ATF2 0.1ml

腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體AMPK beta 1 0.1ml

糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體Amylin 0.1ml