豬血管生成素1（ANG-1）ELISA試劑盒組織結(jié)構(gòu)

1、血清：操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心12分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心60分鐘去除顆粒。

3、細(xì)胞上清液：1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。

4、組織勻漿：將組織加入適量生li鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘，取上清液。

5、保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

【技術(shù)原理】

1、抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

2、結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。

3、酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。

4、受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

5、此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

6、加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平)，并且重復(fù)性好，以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。