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        人雌二醇(E2)酶聯免疫分析試劑盒實驗

        點擊次數:1065次 更新時間:2017-03-17

        17羥孕酮Elisa試劑盒本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中雌二醇(E2)含量。
        實驗原理
        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人雌二醇(E2)水平。用純化的人雌二醇(E2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雌二醇(  E2),再與  HRP標記的雌二醇(E2)抗體結合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在 HRP  酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌二醇(E2)呈正相關。用酶標儀在   450nm 波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人雌二醇(E2)濃度。
        標本要求
        1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
        2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
        人雌二醇(E2)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟
        1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
        3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
        4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用
        5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復 5次,拍干。
        6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
        7.溫育:操作同 3。
        8.洗滌:操作同 5。
        9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
        10.終止:每孔加終止液    50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
        11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后 15分鐘以內進行。
        人雌二醇(E2)酶聯免疫分析試劑盒注意事項
        1.17羥孕酮Elisa試劑盒試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
        2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
        3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。
        4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本  OD值大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
        5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
        6.底物請避光保存。
        7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
        9.本試劑不同批號組分不得混用。
        10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
        保存條件及有效期
        11.試劑盒保存:;2-8℃。
        12.17羥孕酮Elisa試劑盒有效期:6個

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