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        產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>負鼠腎近曲小管上皮細胞;OK
         
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        產品名稱:
        負鼠腎近曲小管上皮細胞;OK
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          負鼠腎近曲小管上皮細胞;OK的詳細資料:

        公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

        產品名稱

        生長特性

        貨號

        負鼠腎近曲小管上皮細胞;OK

        貼壁生長

        EY-X63516

        細胞名稱  負鼠腎近曲小管上皮細胞;OK
        形態特性: 上皮細胞

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: 此細胞株最初是為研究X染色體失活時提供X染色體,隨后發現它是*的腎近曲小管上皮細胞的細胞培養模型。此細胞在培養時表達多種受體,并被廣泛地用作研究這些受體的模型。

        培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優質胎牛血清,10%

        傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

        傳代情況: P(36+5)

        凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 陰性
        ?
        冷凍保存細胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        實驗報告:
        一、分離與培養:
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
        5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 抗NADH脫氫酶亞單位1單抗雜交瘤細胞;LP-NADH-F11 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Homo sapiens, human細胞名稱: 抗人Nigo單抗雜交瘤細胞;IF4G7-NOGO RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Streptomyces albosporeus subsp.albosporeu ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IIID12-G7 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) Sorok ..細胞名稱: 抗人ORM1-like2單抗雜交瘤細胞;ⅠE3-A10 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Fusarium moniliforme Sheldon, anamorph細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;1D9 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Homo sapiens, human細胞名稱: 抗人微管a蛋白單抗雜交瘤細胞;2C10D7B5B2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Campylobacter jejuni subsp.jejuni細胞名稱: 抗人BCS1-like小鼠雜交瘤細胞;1C3C12A2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        frozen細胞名稱: 抗人fusion單抗雜交瘤細胞;1F4E6A2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 抗人磷脂酰肌醇蛋白聚糖前體蛋白單抗雜交瘤細胞;3A11C7H4D5 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Homo sapiens, human細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IIIF9 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Homo sapiens, human細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;2G9B9H6A2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Arthrobacter sp.細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;2D6C1C2C5 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 抗人TATAbox結合蛋白反應蛋白單抗雜交瘤細胞;1E2D6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        frozen細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IIB11 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;D7C5E2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        Acanthamoeba healyi Moura et al.細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IF4B7 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
        負鼠腎近曲小管上皮細胞;OK人丙激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒PDGF-ABELISAkit產品規格:48T/96T。

        人蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒PDGF-ABELISAkit產品規格:48T/96T。

        人磷肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒PDGF-ABELISAkit產品規格:48T/96T。

        人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒PDGF-BBELISAKit產品規格:48T/96T。

        人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒PDGF-BBELISAKit產品規格:48T/96T。

        人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒PDGF-BBELISAkit產品規格:48T/96T。

        人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA試劑盒PDGFELISAKit產品規格:48T/96T。

        人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒PDGFELISAKit產品規格:48T/96T。
        操作步驟:
        1、貼壁細胞的消化
        ①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
        化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
        ④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

         

        產品相關關鍵字: 負鼠腎近曲小管 OK 上皮細胞
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