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        產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>胚腎細胞;293T
         
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        產品名稱:
        胚腎細胞;293T
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          胚腎細胞;293T的詳細資料:

        公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

        產品名稱

        生長特性

        貨號

        胚腎細胞;293T

        貼壁生長

        EY-X64121

        細胞名稱  胚腎細胞;293T
        形態特性: 上皮樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: 該細胞由293tsA1609neo衍生而來,含有SV40大T抗原,用于逆轉錄病毒、基因表達和蛋白。

        培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS,2mML-glutamine,1%Penicillin/Streptomycin.

        傳代方法: 1:3-1:8,每周換液2-3次

        傳代情況:

        凍存條件: 90%FBS+10%DMSO

        支原體檢測: 培養法(-)指示細胞法(-)
        ?
        冷凍保存細胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        實驗報告:
        一、分離與培養:
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
        5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        活化T細胞核因子檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSNuclear factor of activated T-cells

        腎損傷因子1檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSKidney injury molecule 1

        卵黃生成素檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSvitellogenin

        吲哚乙檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSIndole-3-acetic acid

        環氧化物酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSCyclooxygenase

        維生素K環氧化物還原酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSvitaminKepoxidereductase

        幽門螺桿菌尿素酶抗體檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSHPU-Ab

        幽門螺桿菌細胞素相關基因蛋白A-IgG檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSHeli-cobactor pylori Cytotoxin associated gene A

        尿卟啉原Ⅲ檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSUrogenⅢ

        B細胞淋巴瘤因子6檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSB-cell leukemia/lymphoma 6,Bcl6

        卵黃蛋白原2檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSVitellogenin2

        白血病病P27抗體檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSALVP27-Ab

        免疫球蛋白重鏈可變區檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSIGHV

        巰基氧化酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSthiol oxidase

        氨基肽酶檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSaminopeptidase

        X型膠原蛋白檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSCollagen Type X

        S轉移酶α檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSGlutathione S Transferase Alpha
        胚腎細胞;293T歐夾竹桃苷465-16-7中文別名:歐夾竹桃甙;歐蓮素  

        英文名:Oleandrin  

        英文別名:(3-beta,5-beta,16-beta)-hexopyranosyl)oxy)-14-hydroxy  

        CAS登錄號:465-16-7

        分子式:C32H48O9

        分子量:576.73

        分子結構:

        外觀:白色晶體

        規格:20 mg/支

        純度:≥ 98%

        用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

        提取來源:夾竹桃科植物歐洲夾竹桃(Nerium oleander L.)的葉

        溶解性:可溶于、乙醇,幾乎不溶于水。

        熔點:250℃

        旋光度:-48.0°()

        藥理藥效:強心、利尿作用。

        貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

        有效期: 2年
        操作步驟:
        1、貼壁細胞的消化
        ①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
        化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
        ④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

         

        產品相關關鍵字: 胚腎細胞 293T
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        021-69985169
        13611928337,15021460884

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